3.1 Principios de la programación
3.2 Colector de Fracciones Listo para su uso con las gradillas suministradas
3.3 Programación del OMNICOLL para cualquier gradilla o recipiente
3.4 Panel de control del Colector de fracciones OMNICOLL
3.5 Colección de las fracciones de acuerdo a su volumen
3.6 Calibración de las bombas peristálticas y el OMNICOLL
3.7 Colección de fracciones con un intervalo de tiempo entre ellas (“alto” o “high”)
3.8 Colección de las fracciones con múltiples flujos y canales
3.9 ¿Cómo incrementar la capacidad del colector de fracciones?

3.1 Principle of programming

La práctica diaria en el laboratorio demuestra que la programación de los instrumentos equipados con microprocesadores no es simple y se pueden cometer errores fácilmente, especialmente cuando estos instrumentos son utilizados de manera ocasional.

Hemos desarrollado un nuevo método para eliminar estos problemas y hacer la programación fácil para todos los tipos de gradillas y tubos de cualquier capacidad.

Figura 3.1-1 Banda magnética codificadora para el posicionamiento de las fracciones.
Figura 3.1-2 Las posiciones de las fracciones son indicadas con líneas blancas dibujadas en la banda magnética codificadora negra como se muestra.
Figura 3.1-3 El inicio y el final de una fila son indicados por líneas cortas (alrededor de la mitad de la longitud de las bandas normales o menos y ~5 mm de ancho) hechas en el borde inferior (para el inicio) y en el borde superior (en el final) de la banda codificadora, respectivamente.
Figura 3.1-4 la distancia entre las filas de las fracciones se programa de forma similar. Si Ud desea apagar el colector automáticamente después de la última fila, dibuje la última línea más ancha (aprox. 1cm).

Las posiciones en las cuales se detendrá el colector LAMBDA OMNICOLL, para la colección de muestras y fracciones, se marcan de forma sencilla con una línea blanca de aproximadamente 2 mm de ancho en la altura completa sobre las bandas magnéticas de codificación. Por medio de sensores fotoeléctricos, el aparato reconoce esas líneas y se detiene en las posiciones indicadas, hasta que el tiempo de la toma de fracciones o el volumen deseado sean alcanzados. Luego, se mueve automáticamente a la posición siguiente. La posición real de fracción es alrededor de 1 mm después del primer borde de las líneas blancas. El número de muestras y fracciones y la distancia entre las mismas pueden personalizarse según sea necesario.

Las señales de inicio y final (en la Figura 3.1-3) determinan al mismo tiempo la posición de la primera y la última fracción en la fila. La posición de la fracción se encuentra aproximadamente a 2 mm después del primer borde de la línea blanca de las rayas iniciales y finales.

Este código simple permite el uso de cualquier gradilla u otros recipientes con el colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL.

 

3.2 Colector de Fracciones Listo para su uso con las gradillas suministradas

Las bandas codificadoras magnéticas programadas con las líneas blancas para las gradillas deseadas son suministradas con el Colector de fracciones OMNICOLL.

¡Coloque la banda magnética codificadora estrictamente en posición horizontal dentro de la ranura correspondiente! De no ser así, los detectores ópticos pueden dañarse.

Figura 3.2-1 Coloque la banda codificadora larga y estrecha (eje Y) en la parte interior del marco izquierdo metálico debajo de la corredera dentada como se muestra. La primera línea blanca debe estar alrededor de 10 cm de la parte frontal del marco.
Figura 3.2-2 Tire del soporte para la banda codificadora magnética del eje X de la unidad de control del OMNICOLL como se muestra.
Figura 3.2-3 Coloque la banda magnética corta y ancha en el soporte para el eje X.
Figura 3.2-4 Inserte el soporte del eje X con la banda magnética codificadora dentro de la ranura de la unidad de control, con las líneas blancas hacia arriba.

 

3.3 Programación del OMNICOLL para cualquier gradilla o recipiente

3.3.1 Codificación del eje X para la distancia de los tubos en una fila

Mida la distancia entre los centros de los tubos de cada gradilla y escoja el número de fracciones en una fila.

Las señales de inicio y final en los bordes inferior y superior de la banda codificadora informan al microprocesador si el brazo de la unidad de control está en la derecha o en la izquierda.
Figura 3.3-1 Coloque las bandas codificadoras magnéticas sobre la gradilla y marque la posición de la colección con un lápiz normal.
Figura 3.3-2 Dibuje las líneas blancas correctamente en los lugares pre-marcados. Reserve aproximadamente 2cm de la banda codificadora para la señales de posición inicial y final.
Figura 3.3-3 Marque las señales inicio y final en los bordes inferior y superior de la banda codificadora respectivamente. Deje un mínimo de cerca de 6 mm de espacio libre entre la primera y última línea de la fila y las señales de inicio y final.
Figura 3.3-4 Coloque la banda magnética codificadora en el soporte del eje X e insértelo en la ranura deseada en la unidad de control, con las líneas blancas orientadas hacia arriba.

 

3.3.2 Codificación del eje Y para la distancia entre filas

Mida la distancia entre las filas. Cuando se emplean muchas gradillas, ponga atención a la diferencia en la distancia entre la última fila de la primera gradilla y la primera fila de la gradilla a continuación.

Si el colector de fracciones debe detenerse en la última fila, entonces haga esta línea más ancha (aprox. 1cm de amplitud). Esto funcionará como una señal de parada.

Dado que la banda codificadora se mantiene en su lugar por magnetismo, esta puede ser fácilmente posicionada.

La primera línea de la fila del eje Y debe ser situarse a 10 cm desde el frente.

Cuando la unidad de control se coloca en la posición de inicio en el frente del marco, el detector fotoeléctrico en el lado izquierdo de la unidad de control tiene que estar situado antes de la primera línea. De lo contrario la unidad de control se detendrá en la posición de la próxima fila.
Figura 3.3-5 Marque la distancia de la fila con un lápiz en la banda codificadora para el eje Y y dibuje las líneas blancas con el corrector suministrado.
Figura 3.3-6 Coloque la banda codificadora magnética en la cara interna izquierda del marco de metal justo debajo de la corredera dentada.

 

3.4 Panel de control del Colector de fracciones OMNICOLL

 

3.4.1 Selección de los modos de colección lineal, meandro o en fila

El colector de fracciones y muestras LAMBDA OMNICOLL permite los siguientes modos de operación:

Línea:

Las fracciones o muestras se toman de la izquierda a la derecha. Después de la última fracción de la fila el brazo colector se mueve a la izquierda a la primera posición de la fila siguiente.

Meandro (Zig zag):Las fracciones se toman alternamente de la izquierda a la derecha y en la fila siguiente de la derecha a la izquierda etc.
En filas:El brazo colector no se mueve en la fila. El colector sólo se mueve de una fila a la siguiente fila etc. Este modo de colección se utiliza principalmente para la toma de fracciones o muestras simultáneas en configuración multicanal.

En el modo de fila, la posición del brazo colector de fracciones puede ser ajustado con el botón STEP.

 Una pequeña diferencia en las posiciones de las fracciones con respecto a los centros de los tubos pueden presentarse entre facciones tomadas en direcciones opuestas de colección. Si las líneas de las fracciones no son muy anchas (alrededor de 2 mm), esta diferencia en la posición es de aproximadamente 1 mm
Figura 3.4-1 Presione el botón LINE mientras conecta la fuente de energía a la toma principal. Presionando el botón SELECTION (debajo de COUNT/TIME) seleccione el modo de colección.
Figura 3.4-2 El mensaje “rouu” para el modo de filas aparece en la pantalla, cuando se continúa presionando el botón SELECTION.
Figura 3.4-3 El mensaje “Mean” es para el modo de colección de meandro.
Figura 3.4-4 El mensaje “Line” es para el modo de colección lineal.
Figura 3.4-5 Confirme el modo con el botón SET.

 

3.4.2 Resolución para el tiempo (0.1 o 1 minuto)

La resolución para el tiempo en el Colector de fracciones OMNICOLL puede seleccionarse de la siguiente forma:

Figura 3.4-6 Presione el botón COUNT/TIME mientras conecta la fuente de energía a la toma principal.
Figura 3.4-7 La resolución del tiempo real aparecerá en la pantalla “0.1M” o “1M”.
Figura 3.4-8 Presionando el botón COUNT / TIME debajo de los LEDs COUNT y TIME Ud puede seleccionar usar pasos de 0.1 minuto “0.1M” o pasos de 1 minuto “1M”.
Figura 3.4-9 Confirme la selección presionando el botón SET.

 

3.4.3 División del conteo de gotas y del número de impulsos (factor de división)

Esta función permite el aumento significativo del volumen de la muestra colectada (en 60 veces o por un factor de 60), ya sea si se trabaja con un contador de gotas (no. art. 6926) o con un contador de impulso de los motores de las bombas LAMBDA u otras (Modo Count).

El divisor del número de impulsos puede ser configurado ya sea puede dividir estos por 1 o entre 60. Durante la división por 1, se cuenta cada gota o cada impulso de motor. Durante la división entre 60, se genera una señal cada 60 gotas o impulsos de motor.

El volumen de las fracciones puede ser variado también por medio de la selección del tubo de diámetros desde 0.5 hasta 4 mm, cuando fracciones de volumen constante son colectadas controladas por el conteo de los impulsos de la bomba (en el modo de operación “COUN”– el LED COUNT estará encendido, ver sección 3.5).

Figura 3.4-10 Presione el botón START mientras conecta el cable a la red eléctrica.
Figura 3.4-11 Aparecerá en la pantalla la señal “div” y justo después “=01” o “=60”.
Figura 3.4-12 Presionando el botón COUNT /TIME seleccione el factor de división deseado.
Figura 3.4-13 Confirme su selección presionando el botón SET.

 

3.4.4 Selección de la dirección (para el control desde la PC)

El Colector de fracciones OMNICOLL puede ser controlado digitalmente, por ejemplo, desde una PC, si está equipado con la interfaz RS-232 opcional.

Figura 3.4-14 Mientras mantiene presionado el botón de dirección STEP conecte el equipo a la red eléctrica.
Figura 3.4-15 El mensaje “A” y dos números aparecerán en la pantalla. Este número desde 00 hasta 99 es la dirección actual del colector de fracciones.
Figura 3.4-16 Para cambiar la dirección presione los botones de flechas debajo de la pantalla hasta llegar al deseado.
Confirm the choice by pressing the button SET.
Figura 3.4-17 Confirme la selección presionando el botón SET

 

3.5 Colección de las fracciones de acuerdo a su volumen

Si Ud utiliza el Colector de fracciones OMNICOLL junto con las bombas peristálticas LAMBDA PRECIFLOW, MULTIFLOW, HIFLOW o MAXIFLOW, puede tomar fracciones o muestras de volúmenes precisos (desde 0.05 a 500 ml o 0.6 a 30 litres por fracción).

Estas bombas cuentan con un motor paso a paso o un motor BLDC, controlado por un generador de impulsos eléctricos (microprocesador). Cada impulso mueve el motor de la bomba en un paso. Este movimiento desplaza una pequeña cantidad precisa de líquido bombeado.

El colector de fracciones cuenta estos impulsos y por consiguiente es posible dispensar un volumen exacto de líquido por cada fracción. Este método es una alternativa atractiva a los viejos procedimientos de conteo de gotas, donde el volumen es afectado por la viscosidad, la tensión superficial, entre otras propiedades del líquido en cuestión.

Dado que el diámetro interior de la manguera utilizada en la bomba afecta la velocidad de flujo o caudal y que además el número de impulsos contados corresponde a un volumen determinado de líquido bombeado, se hace necesario primero una calibración para determinar la relación entre el número de impulsos y el volumen de líquido bombeado.

 

3.6 Calibración de las bombas peristálticas y el OMNICOLL

La bomba peristáltica LAMBDA se conecta con el cable de control remoto (no. art. 4810- s) a través del módulo de comunicación (no. art. 6911 ó 6929) al Colector de fracciones OMNICOLL. El cable de conexión a la fuente de energía o red eléctrica principal también se conecta en esta caja de conexión. Se seleccionaron los conectores y enchufes de forma que no pueden ser enchufados incorrectamente.

Figura 3.6-1 Conecte el cable de control remoto de la bomba peristáltica al módulo de comunicación.
Figura 3.6-2 Con el botón COUNT/TIME, seleccione el modo de conteo (COUNT) (LED amarillo COUNT encendido).
Figura 3.6-3 Seleccione el número de conteo deseado con los botones de flechas Λ Λ Λ Λ debajo de la pantalla Ej.: 55.
Figura 3.6-4 Confirme su selección presionando el botón SET.
Figura 3.6-5 Seleccione el control de velocidad en la bomba peristáltica (Ej. 700), seleccione la dirección de rotación de la bomba y enciéndala.
Figura 3.6-6 Presione el botón START en el colector para iniciar la colección de fracciones. Si la manguera no se llenó del todo con el líquido, tome una segunda fracción/muestra.

Mida el volume de esta fracción. Este volumen corresponde al número de impulsos ya establecidos o configurados.

A partir de la relación (volumen/número de impulsos), calcule el número de impulsos que corresponde al volumen de fracción deseado.

Dado que el diámetro interno de los tubos que se pueden usar en las bombas LAMBDA puede ser desde 0,5 hasta 4mm, (con grosor de pared de ~1 mm) el volumen de la fracción puede seleccionarse en un amplio intervalo. Como orientación cuando se usa un tubo con diámetro interno de 3 mm, el conteo de 1 (un impulso) corresponde aprox. a una gota.

 

3.7 Colección de fracciones con un intervalo de tiempo entre ellas (“alto” o “high”)

El Colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL puede ser empleado para la colección de muestras con un intervalo de tiempo entre fracciones consecutivas que puede variar entre 0.1 min y 16.6 horas (999.9 min) o 1 min y 166 horas (9999 min).

Esto es particularmente útil durante las fermentaciones y otros procesos químicos y biológicos. Para esta aplicación, cambie el microprocesador de la unidad de control al modo “high”.

Selección del modo high:

Figura 3.7-1 Presione el botón SET en la unidad de control y a la vez conéctela a la red eléctrica.
Figura 3.7-2 Use el botón COUNT/TIME para seleccionar el modo “high”.
Figura 3.7-3 Confirme su selección presionando el botón SET (escuchará una larga señal beep).

En el modo “high” Ud puede seleccionar sucesivamente parámetros tales como TIME, COUNT, PAUSA y NUMEROS presionando el botón COUNT/TIME.

Después de la selección de alguno de estos parámetros con el botón COUNT/TIME entonces presione el botón SET.

Después de un corto beep aparecerá el nombre del parámetro durante 1 segundo, seguido por el último valor empleado para dicho parámetro.

Ud puede cambiar este valor por medio de los botones de flechas Λ Λ Λ Λ debajo de la pantalla. Presione el botón SET para confirmar el nuevo valor introducido (un beep largo).

Selecting the parameter COUNT
Figura 3.7-4 Seleccione el parámetro COUNT (volumen).
[LED del Count: encendido ON;
LED del Time: apagado OFF;
Pantalla: coUn]
Figura 3.7-5 Seleccione el parámetro TIME para ejecutar el programa para un tiempo deseado.
[LED del Count: apagado OFF;
LED del Time: encendido ON;
Pantalla: tiMe]
Figura 3.7-6 Seleccione el parámetro PAUSE (pausa) para introducir pausas en el programa.
[LED del Count: encendido ON;
LED del Time: encendido ON;
Pantalla: PAUS]
Figura 3.7-7 Seleccione el parámetro NUMBER para colectar un número de muestras.
[LED del Count: apagado OFF;
LED del Time: apagado OFF;
Pantalla: nUMb]

Después de introducir los parámetros en el colector de fracciones la colección se comienza con el botón START.

El colector tomará el número de muestras programadas bajo la configuración de NUMBER (número) y se detendrá por el tiempo programado bajo la configuración del parámetro PAUSE (pausa). Este ciclo continuará hasta que se encuentre una señal de parada STOP. La bomba peristáltica LAMBDA se activa automáticamente solo durante la colección de las fracciones.

Cuando el colector de fracciones es controlado desde el panel frontal (Ej no por el control remoto) colectará el número de fracciones /muestras introducidas en el parámetro NUMB de duración TIME o volumen COUNT (si se emplea un contador de gotas o bombas LAMBDA) seguido por la PAUSE, si esta fue seleccionada o configurada.

Entonces el colector de fracciones repetirá este procedimiento hasta encontrar una señal de STOP (ej. Si se presiona la tecla STOP en el colector de fracciones o si se detiene por el imán o magneto de final). Este modo de colección permite por ej. un paso de lavado de la línea antes de que tenga que colectar o tomar una fracción relevante.

Si se opera por una señal externa (analógica) de control, el colector de fracciones tomará el número configurado de fracciones o muestras de duración TIME o volumen COUNT (si se emplea un contador de gotas o bombas LAMBDA), y no se detendrá hasta la recepción de una nueva señal externa de control remoto.

El parámetro PAUSE es ignorado en este modo de operación.

Este tipo de modo de colección es útil para tomar fracciones o muestras en un proceso donde una situación de alarma para un parámetro de proceso seleccionado ha ocurrido y las muestras pueden ser usadas para análisis posteriores.

 

3.8 Colección de las fracciones con múltiples flujos y canales

El colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL puede ser empleado para todo tipo de cromatografía tales como la normal o a baja presión. También es apropiado para las cromatografías a presión media, algunas veces llamada cromatografía líquida rápida para proteínas (FLPC) o para cromatografías líquidas de alta presión (HPLC), conocida como cromatografía líquida de alta resolución.

Una propiedad interesante del colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL es la posibilidad de colectar simultáneamente los eluatos de varias columnas cromatográficas.

Para ello está disponible un ensamblaje de 2 a 18 o incluso mayor número de eluatos de múltiples columnas cromatográficas.

En el número de flujos cromatográficos simultáneos que es capaz de cubrir el OMNICOLL no es superado por ningún otro colector de fracciones en el mercado.

TEste ensamblaje de multi-flujos es técnicamente muy simple y polivalente. Este permite una fácil adaptación a las necesidades experimentales directas del usuario.

Para más información acerca del montaje para multi-flujos, por favor no dude en contactarnos support@lambda-instruments.com

Figure 3.8-1 Example of taking 1x3 simultaneous streams with 96-well plates
Figure 3.8-2 Example of taking 6 simultaneous streams (1x6) into 96-well plates
Figura 3.8-3 Ejemplo de la toma simultánea de 20 fracciones en una configuración de 20-canales.
Figura 3.8-4 Colector de fracciones con capacidad extendida a 12 flujos y botellas de colección de 250 mL.

 

3.9 ¿Cómo incrementar la capacidad del colector de fracciones?

La capacidad de recolección del colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL se puede ampliar varias veces y fácilmente juntando varias bases del colector de fracciones una tras otra (con barras de acoplamiento). El colector pasa libremente de una base a la otra.

La unidad de control puede moverse libremente desde un módulo a otro por las correderas dentadas y sus engranajes. Solo se necesitan barras de acoplamiento rectangulares para mantener dos unidades o módulos unidos.

• Quite los tapones de cierre de la parte trasera del marco de la primera base (uno contiene también el contacto fijo para detener el colector al llegar al final de la base) y de la parte delantera de la segunda base. Inserte las barras de acoplamiento (Art. No. art. 6912) en lugar de los tapones de cierre y fíjelos con los cuatro tornillos
• Vuelve a poner la señal fija para detener el colector en la última base de forma que asegure eliminarlo de la primera. También se puede utilizar el contacto magnético (imán de detención) a la posición deseada debajo de la barra dentada derecha.
• Asegúrese de que la unidad pueda moverse sin ningún obstáculo durante la toma de muestras y fracciones y si la longitud de la manguera es suficiente.

La capacidad de tubos del colector de fracciones LAMBDA OMNICOLL puede ser fácilmente incrementada por la adición de bases o módulos. Teóricamente cualquier número de extensiones puede ser adicionado.

Figure 3.9-1 Fraction collector with extended 30 mm tube rack capacity: 3 times (= 288 fractions)